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五羟色胺elisa的操作流程及注意事项

发布时间:2023-03-07      点击次数:240
  五羟色胺elisa是色氨酸代谢的中间产物,它主要存在于肠嗜铬细胞、血清素激活的神经元和血小板中,它已被确定为是中枢神经系统的一种神经递质。循环血液中的五羟色胺几乎都集中于血小板内。循环五羟色胺浓度的变化可反映出人体的一些病理变化,这些病理变化包括:慢性肌紧张性头痛、精神分裂症、高血压、舞蹈症和早期急性阑尾炎。血清五羟色胺的检测对类癌综合征的检测具有重要临床意义。人们预计:在不久的将来,人们对血小板内五羟色胺的研究兴趣(包括五羟胺的吸收及释放动力学研究)应该会不断增长。
  
  五羟色胺elisa操作流程:
  
  1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  
  2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  
  3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
  
  4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  
  5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  
  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  
  7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
  
  五羟色胺elisa注意事项:
  
  1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。
  
  2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
  
  3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。
  
  4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
  
  5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
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